主要完成人：张建峰、刘志成、和彦良、马祥、谢乐新、卢受昇、黄律、黄念、吴莹莹、黎少国、孙俊颖、沈海燕、张春红、王片片、文开顺

主要完成单位：篮球博彩动物卫生研究所、广东省动物疫病预防控制中心、华威特（江苏）生物制药有限公司、广东省现代农业装备研究所、勃林格殷格翰动物保健（上海）有限公司、佛山瑞宝动物保健有限公司、惠州东进农牧股份有限公司、广东广宁广三保畜牧有限公司

获奖类别：篮球博彩科技进步奖一等奖

成果简介：

       本项目聚焦猪蓝耳病和猪伪狂犬病（简称两病）精准诊断技术匮乏、疫苗种类繁多且免疫保护力比较研究缺失、净化体系不完善等疫病净化核心问题。 

       1.建立基于HRM和FMCA技术研发针对两病疫苗株和野毒株的精准分子鉴别技术，形成检测体系，搭建精准检测研发平台。 针对猪蓝耳病、猪伪狂犬病疫苗毒株多、基因型复杂、精准诊断技术匮乏的现状，利用HRM和FMCA技术对核酸差异精准可视化的特点，设计了四对引物和四条探针，组合建立了猪蓝耳经典毒株、变异毒株、JXA1-R、GDr180、TJM-F92等野毒及疫苗毒株精准检测体系和猪伪狂犬欧美株、中国株及Bartha-K61疫苗毒株的分子鉴别检测体系，前者克服了猪蓝耳临床毒株复杂和疫苗毒株多的现实难点，后者攻克了猪伪狂犬GC高、PCR扩增难的技术难点，为排除疫苗株干扰开展精准临床诊断提供技术手段，解决了实际生产中临床精准检测缺乏、高通量诊断难等问题。 

       2.研制可实现鉴别检测的高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗，构建疫苗免疫防控流行毒株的保护效力比较评测体系。 

       筛选获得具有Nsp2基因序列缺失360bp的特色疫苗毒株，以此作为与野毒株鉴别标志用于临床分子鉴别检测和免疫抗体检测；采用微载体悬浮培养技术对毒株进行细胞培养条件优化，大大提高病毒滴度，减少细胞降解及污染的风险，该疫苗产品对经典毒株、NADC30-Like毒株均有良好的交叉保护作用，无免疫干扰、效果良好。基于商品化疫苗种类繁多、疫苗效力比较数据缺乏的现状，通过开展系统化动物保护评估试验，构建了疫苗免疫防控流行毒株的保护效力比较评测体系，为优化净化方案、优选疫苗提供重要参考。 

       3.制定科学有效的“两病”净化控制方案，应用于200多家规模化猪场，效果良好。方案融合了“两病”精准分子诊断技术、疫苗免疫、抗体评测体系以及生物安全防控技术，通过政府行业部门、研究所及养殖企业的通力合作，“两病”净化示范成效显著。16家规模化养殖企业获得17个省级伪狂犬净化场授牌并维持猪伪狂犬净化状态，3家获得国家级猪伪狂犬净化场授牌，所有34家猪蓝耳病均处于控制状态，净化控制成效助力9家养殖场通过国家无非洲猪瘟小区验收。

       该项目获得新兽药证书1件，生产批文1个，高新技术产品证书1个，授权国家发明专利4件（成功转化1件），发表文章7篇（SCI 4篇）；累计培训技术人员11.5万人次；“两病”控制净化效果显著，推动了全国、华南地区特别广东省生猪养殖产业高质量发展；2019-2021年底示范推广企业新增销售额35.5亿元，新增利润24亿元，带动周边农民就业率与收入的增长，经济效益显著。